無菌實驗室設計裝修要點細節及使用

發布時間：2023-01-03 20:02:58 丨 瀏覽次數：

在微生物工作中，菌種的接種移植是一項主要操作，這項操作的特點就是要保證菌種純種，防止雜菌的污染。在一般環境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對接種工作干擾很大。而無菌室的存在對于菌種的保護起到了很好的作用，減少了污染情況，所以無菌室也稱接種室，是系統接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。

一、無菌室裝修施工的細節重點

根據經濟和科學的角度來講，無菌室設置的基本要求如下：

（1）門應設在離工作臺最遠的位置上，內間應當設拉門，以減少空氣的波動；外間的門最好也用拉門，要設在距內間最遠的位置上。

（2）無菌室應有內、外兩間，內間是無菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過大，以便于空氣滅菌。內間面積2×2.5＝5m2，外間面積1×2＝2m2，

高以2.5m以下為宜，都應有天花板。

（3）無菌室容積小而嚴密，使用一段時間后，室內溫度很高，故應設置通氣窗。通氣窗應設在內室進門處的頂棚上（即離工作臺最遠的位置），最好為雙層結構，外層為百葉窗，內層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內室使用后、滅菌前開啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。

（4）在分隔內間與外間的墻壁或“隔扇”上，應開一個小窗，作接種過程中必要的內外傳遞物品的通道，以減少人員進出內間的次數，降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內外都掛對拉的窗扇。

二、無菌室內設備和用具

（1）外室應有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。

（2）內室應有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢物筐等。

（3）無菌室內的工作臺，不論是什么材質、用途的，都要求表面光滑和臺面水平。

（4）在內室和外室各安裝一個紫外燈（多為30W）。內室的紫外線燈應安裝在經常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線燈可安裝在外室中央。

三、無菌室設計裝修后的實驗操作注意事項

1．實驗進行前，無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。

2．小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

3．工作人員應注意自身之安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作，并選擇適當等級之無菌操作臺(至少ClassII)。操作過程中，應避免引起氣溶膠類物質的產生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等。

4．接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養物。

5．無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70%的酒精擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在抬面之中央無菌區域，勿在邊緣的非無菌區域操作。

6．使用無菌瓶內的溶液時，不可將無菌敷料堵塞瓶口傾倒無菌溶液，或直接伸入溶液瓶內蘸取，以免污染剩余的溶液。

7．每次操作過程中，均應做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。

8．如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

9．無菌包內物品不慎污染或無菌包浸濕，外界微生物可滲入包內，造成污染，需重新消毒。

10．凡帶有活菌的物品，必須經消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴禁污染下水道。

11．吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

12．帶有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24小時后取出沖洗。

13．戴手套時應注意未戴手套的手不可觸及手套外面，而戴手套的手則不可觸及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如發現破裂，應立即更換。脫手套時，須將手套口翻轉膠下，不可用力強拉手套邊緣或手指部分，以免損壞。

14．實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后。